But et étapes d'un test de caryotype
Si votre médecin vous a recommandé un test de caryotype pour vous ou votre enfant, ou après une amniocentèse, qu'est-ce que ce test implique? Quelles conditions un caryotype peut-il diagnostiquer, quelles sont les étapes de la réalisation des tests et quelles sont ses limites?
Qu'est-ce qu'un test de caryotype?
Un caryotype est une photographie des chromosomes dans une cellule . Les caryotypes peuvent être prélevés sur des cellules sanguines, des cellules de la peau fœtale (du liquide amniotique ou du placenta) ou des cellules de la moelle osseuse.
Quelles conditions peuvent être diagnostiquées avec un test de caryotype?
Les caryotypes peuvent être utilisés pour dépister et confirmer les anomalies chromosomiques telles que le syndrome de Down, et il existe plusieurs types d'anomalies qui peuvent être détectés.
L'un d'eux est des trisomies dans lesquelles il y a trois copies de l'un des chromosomes plutôt que deux. En revanche, les monosomies se produisent lorsqu'une seule copie (au lieu de deux) est présente. En plus des trisomies et des monosomies, il existe des délétions chromosomiques dans lesquelles une partie d'un chromosome est absente, et des translocations chromosomiques, dans lesquelles une partie d'un chromosome est attachée à un autre chromosome (et vice versa dans des translocations équilibrées).
Des exemples de trisomies comprennent:
- Le syndrome de Down (trisomie 21)
- Syndrome d'Edward ( trisomie 18 )
- Le syndrome de Patau (trisomie 13)
- Syndrome de Klinefelter (XXY et autres variations) - Le syndrome de Klinefelter survient chez 1 nouveau-né sur 500 et semble augmenter
- Syndrome Triple X (XXX)
Un exemple de monosomie comprend:
- Syndrome de Turner (X0) ou monosomie X - Environ 15% des avortements spontanés sont dus au syndrome de Turner, mais cette trisomie n'est présente qu'environ 1 naissance vivante sur 2 000
Des exemples de délétions chromosomiques comprennent:
- Syndrome de Cri-du-Chat (chromosome 5 manquant)
- Syndrome de Williams (chromosome manquant 7)
Translocations - Il existe de nombreux exemples de translocations, y compris la translocation Down syndrome. Les translocations robertsoniennes sont assez fréquentes, se produisant chez environ 1 personne sur 1000.
Le mosaïcisme est une condition dans laquelle certaines cellules du corps ont une anomalie chromosomique alors que d'autres ne le font pas. Par exemple, le syndrome mosaïque de Down ou la trisomie mosaïque 9. La trisomie 9 complète n'est pas compatible avec la vie, mais la trisomie 9 en mosaïque peut entraîner une naissance vivante.
(Un exemple vaut mille mots.) Renseignez-vous sur les différences entre la translocation, la trisomie et le syndrome mosaïque de Down .)
Quand un caryotype est-il fait?
Il existe de nombreuses situations dans lesquelles un caryotype peut être recommandé par votre médecin. Ceux-ci pourraient inclure:
- Les nourrissons ou les enfants qui ont des conditions médicales qui suggèrent une anomalie chromosomique qui n'a pas encore été diagnostiquée.
- Les adultes présentant des symptômes évocateurs d'une anomalie chromosomique (par exemple, les hommes atteints de la maladie de Klinefelter peuvent ne pas être diagnostiqués avant la puberté ou l'âge adulte.) Certains troubles de la trisomie mosaïque peuvent également ne pas être diagnostiqués.
- Infertilité - Un caryotype génétique peut être fait pour l'infertilité. Comme indiqué ci-dessus, certaines anomalies chromosomiques peuvent ne pas être diagnostiquées jusqu'à l'âge adulte. Une femme avec le syndrome de Turner ou un homme avec l'une des variantes de Klinefelter peuvent ne pas être au courant de l'état jusqu'à ce qu'ils font face à l'infertilité.
- Le test prénatal - Dans certains cas, comme le syndrome de Down translocation, la condition peut être héréditaire et les parents peuvent être testés si un enfant est né avec un syndrome de Down. (Il est important de noter que la plupart du temps, le syndrome de Down n'est pas un trouble héréditaire, mais plutôt une mutation fortuite.)
- Mortinatalité - Un caryotype est souvent fait dans le cadre des tests après une mortinaissance.
- Avortements récurrents - Un caryotype parental de fausses couches récurrentes peut donner des indices quant aux raisons de ces pertes récurrentes dévastatrices. On pense que les anomalies chromosomiques, telles que la trisomie 16 sont la cause d'au moins 50 pour cent des fausses couches.
- Leucémie - Des tests de caryotype peuvent également être effectués pour aider à diagnostiquer les leucémies, par exemple, en recherchant le chromosome de Philadelphie chez certaines personnes atteintes de leucémie myéloïde chronique ou de leucémie lymphocytaire aiguë.
Étapes impliquées dans un test de caryotype
Un test de caryotype peut ressembler à un simple test sanguin, ce qui fait que beaucoup de gens se demandent pourquoi il faut si longtemps pour obtenir les résultats. Ce test est en fait assez complexe après la collecte. Jetons un coup d'oeil à ces étapes afin que vous puissiez comprendre ce qui se passe pendant le temps que vous attendez le test.
1. Collection d'échantillons
La première étape de l'exécution d'un caryotype consiste à prélever un échantillon. Chez les nouveau-nés, un échantillon de sang contenant des globules rouges, des globules blancs, du sérum et d'autres liquides est prélevé. Un caryotype sera fait sur les globules blancs qui se divisent activement (un état connu sous le nom de mitose). Pendant la grossesse, l'échantillon peut être soit du liquide amniotique prélevé lors d'une amniocentèse, soit un morceau de placenta prélevé lors d'un test d'échantillonnage de villosités choriales (CVS). Le liquide amniotique contient des cellules cutanées fœtales qui sont utilisées pour générer un caryotype.
2. Transport au laboratoire
Les caryotypes sont effectués dans un laboratoire spécifique appelé laboratoire de cytogénétique - un laboratoire qui étudie les chromosomes. Tous les hôpitaux n'ont pas de laboratoire de cytogénétique. Si votre hôpital ou établissement médical n'a pas son propre laboratoire de cytogénétique, l'échantillon sera envoyé à un laboratoire spécialisé dans l'analyse du caryotype. L'échantillon d'essai est analysé par des technologues en cytogénétique spécialement formés, Ph.D. cytogénéticiens, ou généticiens médicaux.
3. Séparation des cellules
Afin d'analyser les chromosomes, l'échantillon doit contenir des cellules qui se divisent activement. Dans le sang, les globules blancs se divisent activement. La plupart des cellules fœtales se divisent également. Une fois que l'échantillon atteint le laboratoire de cytogénétique, les cellules non divisées sont séparées des cellules de division en utilisant des produits chimiques spéciaux.
4. Culture des cellules
Afin d'avoir suffisamment de cellules à analyser, les cellules en division sont cultivées dans des milieux spéciaux ou une culture cellulaire. Ce milieu contient des produits chimiques et des hormones qui permettent aux cellules de se diviser et de se multiplier. Ce processus de culture peut prendre de trois à quatre jours pour les cellules sanguines et jusqu'à une semaine pour les cellules fœtales.
5. Synchronisation des cellules
Les chromosomes sont une longue chaîne d'ADN humain. Afin de voir les chromosomes au microscope, les chromosomes doivent être sous leur forme la plus compacte dans une phase de division cellulaire (mitose) connue sous le nom de métaphase. Afin d'obtenir toutes les cellules à ce stade spécifique de la division cellulaire, les cellules sont traitées avec un produit chimique qui arrête la division cellulaire au point où les chromosomes sont les plus compacts.
6. Libérer les chromosomes de leurs cellules
Afin de voir ces chromosomes compacts sous un microscope, les chromosomes doivent être hors des globules blancs. Ceci est fait en traitant les globules blancs avec une solution spéciale qui les fait éclater. Ceci est fait pendant que les cellules sont sur une lame microscopique. Les restes de débris des globules blancs sont éliminés, laissant les chromosomes collés à la lame.
7. Coloration des chromosomes
Les chromosomes sont naturellement incolores. Afin de distinguer un chromosome d'un autre, un colorant spécial appelé colorant Giemsa est appliqué sur la lame. Le colorant de Giemsa colore des régions de chromosomes riches en bases adénine (A) et thymine (T). Lorsqu'ils sont colorés, les chromosomes ressemblent à des cordes avec des bandes claires et foncées. Chaque chromosome a un profil spécifique de bandes claires et foncées qui permettent au cytogénéticien de distinguer un chromosome d'un autre. Chaque bande sombre ou claire englobe des centaines de gènes différents.
8. Analyse
Une fois que les chromosomes sont colorés, la lame est placée au microscope pour analyse. Une photo est ensuite prise des chromosomes. À la fin de l'analyse, le nombre total de chromosomes sera déterminé et les chromosomes classés par taille.
9. Chromosomes de comptage
La première étape de l'analyse consiste à compter les chromosomes. La plupart des humains ont 46 chromosomes. Les personnes atteintes du syndrome de Down ont 47 chromosomes. Il est également possible pour les gens d'avoir des chromosomes manquants, plus d'un chromosome supplémentaire, ou une partie d'un chromosome qui est manquant ou dupliqué. En regardant seulement le nombre de chromosomes, il est possible de diagnostiquer différentes conditions, y compris le syndrome de Down.
10. Tri des chromosomes
Après avoir déterminé le nombre de chromosomes, le cytogénéticien commencera à trier les chromosomes. Pour trier les chromosomes, un cytogénéticien va comparer la longueur des chromosomes, le placement des centromères (les zones où les deux chromatides sont jointes), et la localisation et la taille des bandes G. Les paires de chromosomes sont numérotées du plus grand (nombre 1) au plus petit (nombre 22). Il y a 22 paires de chromosomes, appelés autosomes, qui correspondent exactement. Il y a aussi les chromosomes sexuels, les femelles ont deux chromosomes X tandis que les mâles ont un X et un Y.
11. Regard sur la structure
En plus de regarder le nombre total de chromosomes et les chromosomes sexuels, le cytogénéticien examinera également la structure des chromosomes spécifiques pour s'assurer qu'il n'y a pas de matériel manquant ou supplémentaire ainsi que des anomalies structurelles comme les translocations. Une translocation survient lorsqu'une partie d'un chromosome est attachée à un autre chromosome. Dans certains cas, deux morceaux de chromosomes sont interchangés (une translocation équilibrée) et d'autres fois une pièce supplémentaire est ajoutée ou manquante sur un seul chromosome.
12. Le résultat final
En fin de compte, le caryotype final montre le nombre total de chromosomes, le sexe et toutes les anomalies structurelles avec des chromosomes individuels. Une image numérique des chromosomes est générée avec tous les chromosomes disposés en nombre.
Limites du test de caryotype
Il est important de noter que bien que le test du caryotype puisse donner beaucoup d'informations sur les chromosomes, ce test ne peut pas vous dire si des mutations génétiques spécifiques, telles que celles qui causent la fibrose kystique , sont présentes. Votre conseiller en génétique peut vous aider à comprendre ce que les tests de caryotype peuvent vous dire et ce qu'ils ne peuvent pas. D'autres études sont nécessaires pour évaluer le rôle possible des mutations génétiques dans la maladie ou les fausses couches.
Il est également important de noter que, parfois, le test du caryotype peut ne pas être capable de détecter certaines anomalies chromosomiques, comme lorsque le mosaïcisme placentaire est présent.
L'avenir
À l'heure actuelle, le dépistage du caryotype en contexte prénatal est très invasif, nécessitant une amniocentèse ou un prélèvement de villosités choriales. Des études sont en cours pour évaluer l'ADN sans cellule dans l'échantillon sanguin d'une mère comme une alternative beaucoup moins invasive pour le diagnostic prénatal d'anomalies génétiques chez un fœtus.
Bottom Line sur l'attente de vos résultats de caryotype
En attendant les résultats de votre caryotype, vous pouvez vous sentir très anxieux, et la semaine ou les deux qu'il faut pour obtenir des résultats peuvent se sentir comme des éons. Prenez le temps de vous appuyer sur vos amis et votre famille. Apprendre sur certaines des conditions associées à des chromosomes anormaux peut également être utile. Bien que de nombreuses maladies diagnostiquées avec un caryotype puissent être dévastatrices, de nombreuses personnes atteintes de ces maladies ont une excellente qualité de vie.
> Sources
- > Kumar, Vinay, Abul K. Abbas et Jon C. Aster. Robbins et Cotran Base pathologique de la maladie. Philadelphie: Elsevier-Saunders, 2015. Imprimer.
- > Norton, M., et B. Rink. Modification des indications pour les tests invasifs dans une ère de dépistage amélioré. Séminaires en périnatologie . 2016. 40 (1): 56-66.
- > Shah, M., Cinnioglu, C., Maisenbacher, M., Comstock, I., Kort, J. et R. Lathi. Comparaison de la cytogénétique et du caryotype moléculaire pour le test des chromosomes de spécimens de fausse couche. Fertilité et stérilité . 2017. 107 (4): 1028-1033.