Hybridation in situ par fluorescence
L'hybridation fluorescente in situ (FISH) est l'une des techniques utilisées pour rechercher l'ADN de vos cellules, en recherchant la présence ou l'absence de gènes spécifiques ou de parties de gènes.
De nombreux types de cancer sont associés à des anomalies génétiques connues. Et par génétique, nous ne parlons pas seulement de l'hérédité. Au cours de leur vie, les cellules peuvent faire des erreurs lorsqu'elles se divisent et se développent.
Des mutations de l'ADN associées au cancer peuvent s'accumuler dans ces cellules.
Comment fonctionne le poisson?
FISH est une technique qui utilise des sondes fluorescentes pour détecter des gènes spécifiques ou des parties de gènes (séquences d'ADN). Le personnel du laboratoire du centre médical et les oncologues utilisent FISH pour aider à évaluer les patients qui peuvent avoir un cancer, et parfois pour surveiller un patient qui a déjà été diagnostiqué avec un cancer et traité.
FISH peut être fait en utilisant différents types d'échantillons en fonction de l'emplacement et du type de cancer suspecté: cellules tumorales obtenues à partir du sang périphérique, d'une biopsie de moelle osseuse ou d'une biopsie ganglionnaire et de tissus inclus en paraffine fixés au formol. un échantillon de tissu qui est traité dans le laboratoire et incorporé dans un type de cire, le rendant plus rigide, de sorte qu'il peut être découpé en sections minces et monté pour le visionnement sous le microscope).
Que signifient les lettres?
Le "H" dans FISH se réfère à l'hybridation.
Dans l'hybridation moléculaire, une séquence d'ADN ou d'ARN marquée est utilisée comme sonde - visualisez une brique Lego rouge, si vous voulez. La sonde est utilisée pour trouver une brique de Lego, ou une séquence d'ADN, dans un échantillon biologique.
L'ADN dans votre spécimen est comme des piles de briques Lego, et la plupart des briques de ces piles ne correspondent pas à notre sonde rouge.
Et toutes vos briques sont soigneusement organisées en 23 paires de piles de briques - chaque pile est l'un de vos chromosomes homologues appariés, plus ou moins. Contrairement aux briques Lego, notre sonde Lego rouge est comme un aimant puissant et trouve sa correspondance sans avoir à trier les piles.
Le "F" se réfère à la fluorescence. Notre sonde rouge peut se perdre dans les piles de briques, elle est donc étiquetée avec un colorant fluorescent coloré pour qu'elle brille. Quand il trouve sa correspondance parmi les 23 piles appariées, une étiquette fluorescente révèle son emplacement. Ainsi, vous pouvez maintenant voir comment les chercheurs et les cliniciens pourraient utiliser FISH pour aider à identifier où (quel pile, ou quel chromosome) un gène particulier est situé pour un individu donné.
Le "I" et le "S" signifient in situ . Cela fait référence au fait que notre brique rouge Lego cherche sa correspondance dans l'échantillon que vous avez donné .
Qu'en est-il des cancers du sang spécifiques?
FISH et d'autres procédures d'hybridation in situ sont utilisés pour diagnostiquer une variété d'anomalies chromosomiques - changements dans le matériel génétique, les changements dans les chromosomes, y compris les éléments suivants:
Suppression - partie d'un chromosome est parti
Translocation - une partie d'un chromosome se détache et adhère à un autre chromosome
Inversion - une partie d'un chromosome se casse et se réinsère dans, mais dans l'ordre inverse
Duplication - une partie d'un chromosome est présente dans trop de copies dans la cellule
Chaque type de cancer peut avoir son propre ensemble de changements chromosomiques et de sondes pertinentes. FISH aide non seulement à identifier les changements génétiques initiaux dans un processus pathologique comme le cancer, mais il peut également être utilisé pour surveiller la réponse au traitement et la rémission de la maladie.
Les changements génétiques détectés par FISH offrent parfois des informations supplémentaires sur la façon dont le cancer d'un individu est susceptible de se comporter, sur la base de ce qui a été observé dans le passé chez des personnes ayant le même type de cancer et des changements génétiques similaires. Parfois, FISH est utilisé après que le diagnostic a déjà été fait, pour obtenir des informations supplémentaires qui pourraient aider à prédire les résultats d'un patient ou le meilleur traitement.
FISH peut identifier des anomalies chromosomiques dans les leucémies , y compris dans la leucémie lymphoïde chronique (LLC). Pour la leucémie lymphocytaire chronique / lymphome lymphocytaire petit, FISH permet aux patients de connaître leur catégorie pronostique: bon, intermédiaire, ou pauvre. Dans la leucémie lymphoblastique aiguë (LLA), la génétique des cellules leucémiques peut vous renseigner sur le niveau de risque du cancer et aider à orienter les décisions thérapeutiques.
Des panels FISH sont également disponibles pour le lymphome, le myélome multiple, les troubles prolifératifs plasmocytaires et le syndrome myélodysplasique. Dans le cas du lymphome du manteau, par exemple, il existe une translocation que FISH peut détecter, appelée GH / CCND1 t (11; 14), fréquemment associée à ce lymphome.
Pourquoi POISSONS?
Un avantage de FISH est qu'il ne doit pas être effectué sur les cellules qui divisent activement. Les tests cytogénétiques prennent habituellement environ trois semaines, car les cellules cancéreuses doivent se développer dans des boîtes de laboratoire pendant environ deux semaines avant de pouvoir être testées. En revanche, les résultats de FISH sont généralement disponibles au laboratoire dans quelques jours.
> Sources:
> Cytogénétique du cancer Codes CPT.
> Hybridation in situ par fluorescence (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Hybridation in situ par fluorescence (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD, et al. Guide pour l'essai d'hybridation in situ par fluorescence dans les troubles hématologiques. Le Journal of Molecular Diagnostics: JMD. 2007; 9 (2): 134-143.