Qu'est-ce que l'analyse PCR?
L'analyse par réaction en chaîne de la polymérase (PCR) est une technique de laboratoire conçue pour identifier de petites quantités d'ADN dans un échantillon par un processus connu sous le nom d' amplification . Pendant l'amplification par PCR, l'ADN d'intérêt est copié à plusieurs reprises jusqu'à ce qu'il y en ait suffisamment pour l'analyse et la détection. Par exemple, la PCR peut être utilisée pour identifier de petites quantités d'ADN provenant des organismes responsables de la gonorrhée ou de la chlamydia présents dans un échantillon d'urine .
Comment fonctionne la PCR?
La première étape de la PCR consiste à chauffer l'échantillon de sorte que l'ADN double brin se sépare en deux brins simples - c'est ce qu'on appelle la dénaturation . Puis des amorces , de courts échantillons d'ADN qui correspondent aux extrémités de la séquence d'ADN d'intérêt, sont combinés avec l'ADN de l'échantillon. Après cela, une ADN polymérase est utilisée pour commencer la réplication de l'ADN à l'emplacement de l'amorce. Enfin, l'ADN est chauffé pour séparer les brins une fois de plus, et tout le processus de PCR recommence.
La quantité de segment d'ADN présent dans l'échantillon augmente exponentiellement avec chaque cycle de PCR: une copie devient deux, puis devient quatre, puis devient huit, etc .; de manière générale, 20 à 40 cycles seulement sont nécessaires pour déterminer si l'ADN en question est présent (et, si c'est le cas, pour fournir un échantillon suffisant pour l'analyse).
Toutes les étapes d'une réaction en chaîne de la polymérase - dénaturation de l'ADN, application des amorces et allongement de l'ADN - se produisent à différentes températures. Ainsi, après le mélange initial, les étapes peuvent être contrôlées par un processus appelé thermocyclage . dans lequel la température est maintenue aux niveaux nécessaires juste assez longtemps pour que chaque étape ait lieu.
Ainsi, la PCR est un moyen efficace d'amplifier la quantité d'ADN cible dans un seul tube à essai avec peu besoin d'intervention humaine.
La réaction en chaîne de la polymérase a révolutionné la technique biologique au début des années 1980, et le créateur de PCR, Kary Mullis, a remporté le prix Nobel de chimie pour son travail en 1993.
Pourquoi la PCR est-elle pertinente aux tests STD?
La réaction en chaîne de la polymérase, et les techniques apparentées telles que la réaction en chaîne par ligase , s'avèrent être d'une importance croissante pour les tests STD. C'est parce que ces techniques peuvent directement identifier de petites quantités d'ADN ou d'ARN viral dans les échantillons. L'identification du code génétique d'un agent pathogène n'exige pas que le pathogène soit vivant - comme la culture bactérienne ou la culture virale . Il ne nécessite pas non plus que l'infection se soit produite il y a assez longtemps pour que les personnes aient développé une réaction d'anticorps détectable (détectée par ELISA ). Cela signifie que les techniques de PCR peuvent parfois détecter des maladies plus tôt que d'autres tests. autant que vous devez vous préoccuper de conserver des échantillons vivants ou de les tester exactement au bon moment.